青岛华晶生物技术有限公司

【产品名称】

革兰染色液

【包装规格】

单瓶（桶）包装规格为：20ml、50ml、100ml、250ml、500ml、1L、5L

每盒（箱）包装规格为：4×20ml/盒、4×50ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒、4×1L/箱、4×5L/箱

【预期用途】

用于细菌或真菌的涂片染色

【检验原理】

革兰染色法，由丹麦病理学家Christain Gram于1884年创立，是细菌学中很重要的鉴别染色法。通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前二步结果是一样的，但在G+细胞中，乙醇还能使厚的肽聚糖层脱水，导致孔隙变小，由于结晶紫和碘的复合物分子太大，不能通过细胞壁，保持着紫色。在Gˉ细胞中，乙醇处理不但破坏了胞壁外膜，还可能损伤肽聚糖层和细胞质膜，于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来，当再用衬托的染色液复染时，显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞，但被紫色盖没，红色显示不出来。

【储存条件及有效期】

0℃-35℃储存，原包装未开封染色液的有效期为24个月，在有效期内的已开封染色液在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。

生产日期、有效期详见外盒或瓶上标识。

【样本要求】

涂片时必须注意细心操作，涂片薄而均匀。制备的涂片应自然干燥，采用加热固定时，固定温度不宜过高，以背面接触手背不烫为准，否则可能使细菌形态改变影响观察结果。

【检验方法】

1.涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或在载玻片上滴如少许无菌水，取菌与水混合均匀，涂成一薄层；

2.干燥、固定：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥，也可以用甲醇或乙醇固定；

3.初染：滴加结品紫染色液染色0.5~1.5分钟，水洗，甩干；

4.媒染：满加碘溶液覆盖载玻片0.5~1.5分钟，水洗，甩干；

5.脱色：滴加脱色液摇动10~30秒，直至流下的脱色液不出现紫色时为止，立即用水冲去脱色液，甩干；

6.复染：滴加沙黄染色液或复红染色液染色20~60s，水洗；

7.滤纸吸干或在空气晾干，镜检。

【检验结果的解释】

革兰氏阳性菌呈蓝色至紫色，革兰氏阴性菌呈红色。